中國化學(xué)會(huì)第32屆學(xué)術(shù)年會(huì)
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級(jí)聯(lián)i-motifs主導(dǎo)的電化學(xué)阻抗策略用于pH及末端轉(zhuǎn)移酶傳感
胡宇芳* 胡丹丹 胡凱悅 任信信 郭智勇 王邃

分會(huì)

第二分會(huì):納米傳感

摘要

在醫(yī)療診斷和生命科學(xué)研究中,電化學(xué)生物傳感器是應(yīng)用最廣泛的測試器件之一。我們基于交流阻抗技術(shù)和級(jí)聯(lián)i-motifs策略發(fā)展了一種新型電化學(xué)生物傳感策略應(yīng)用于pH及末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)分析。首先,將三磷酸胞嘧啶核苷(dCTP)引入5’巰基DNA修飾的金電極表面,利用TdT工具酶角色催化延長該DNA的3’羥基末端,形成富C DNA長鏈。我們發(fā)現(xiàn)該富C DNA長鏈在中性條件下保持無規(guī)則單鏈狀態(tài);相反,在酸性條件下由于胞嘧啶C被部分質(zhì)子化形成穩(wěn)定的i-motif結(jié)構(gòu),且由于富C DNA長鏈優(yōu)勢形成了級(jí)聯(lián)i-motifs。鑒于此原理,利用[Fe(CN)6]3-/4-作為氧化還原探針通過電化學(xué)阻抗譜(EIS)探討因pH改變導(dǎo)致的富C DNA長鏈構(gòu)型變化,一方面,中性條件下由于富C DNA長鏈的形成,獲得較大的電化學(xué)阻抗值,另一方面,酸性條件下由于級(jí)聯(lián)i-motifs的形成,獲得較小的電化學(xué)阻抗值(半質(zhì)子化富C DNA的形成有利于電子傳導(dǎo)),形成一種十分有意義的電化學(xué)阻抗開關(guān),從而實(shí)現(xiàn)pH傳感分析。此外,這種電化學(xué)阻抗值取決于TdT活性大小,在沒有TdT情況下,這種“off-on-off”開關(guān)無法構(gòu)建,基于此可實(shí)現(xiàn)不同微環(huán)境下TdT活性分析及其小分子抑制劑篩選。目前尚未發(fā)現(xiàn)基于級(jí)聯(lián)i-motifs阻抗開關(guān)實(shí)現(xiàn)不同微環(huán)境下pH及TdT活性動(dòng)態(tài)監(jiān)測的相關(guān)報(bào)導(dǎo)。

關(guān)鍵詞

i-motif;電化學(xué)阻抗;pH;末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶;傳感

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