分會

第三分會：生物分析化學

摘要

本研究設(shè)計了一種基于目標物響應(yīng)DNA水凝膠可控釋放系統(tǒng)的ECL生物傳感器用于Dam甲基轉(zhuǎn)移酶的檢測。該可控釋放系統(tǒng)由透明質(zhì)酸鈉 (HA)、兩端修飾氨基的DNA雙鏈和少量聚乙烯亞胺(PEI)相互交聯(lián)，同時包裹ECL信號分子Ru(bpy)32+摻雜的SiO2納米粒 (Ru@SiO2 NPs)制備而成。其中，DNA雙鏈設(shè)計為含有兩段可以被Dam甲基轉(zhuǎn)移酶識別和甲基化的特殊序列，甲基化的序列進而被DpnI酶特異性剪切。因此，當目標物存在時，水凝膠中DNA的連接被DpnI酶裂解，造成水凝膠三維結(jié)構(gòu)的破裂，使大量Ru@SiO2納米粒子釋放到上清液中，收集上清液進行ECL檢測，能夠檢測到較強的ECL信號。當目標物不存在時，DpnI酶不能剪切未被甲基化的DNA，信號分子無法釋放，上清液的ECL信號較弱。該傳感器在目標物濃度為1-40U/mL范圍內(nèi)存在良好的線性關(guān)系，檢測限為0.08U/mL, 具有良好的選擇性和重現(xiàn)性，且制備的水凝膠具有良好的儲存穩(wěn)定性。該傳感器成功地應(yīng)用于人體血清樣品中DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的檢測，取得了滿意的結(jié)果。

關(guān)鍵詞

電致化學發(fā)光;可控釋放;甲基轉(zhuǎn)移酶

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