分會(huì)

第八分會(huì)：生物無(wú)機(jī)化學(xué)

摘要

在單細(xì)胞水平對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行原位可視化分析有助于探究蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)以及蛋白質(zhì)和小分子之間的相互作用。飛行時(shí)間-二次離子質(zhì)譜 (ToF-SIMS) 通常用于同位素、小分子或分子碎片在微、納米尺度空間分布的成像研究，但很難直接檢測(cè)天然蛋白質(zhì)，這嚴(yán)重限制了該技術(shù)在化學(xué)生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用。氘、氟等元素已被用作二次離子質(zhì)譜成像的標(biāo)記物，在生物分析方面具有巨大的發(fā)展?jié)摿?。本課題中，融合表達(dá)mCherry-ATPB蛋白質(zhì)，通過(guò)遺傳密碼子擴(kuò)展技術(shù)將含氟非自然氨基酸作為化學(xué)標(biāo)簽插入到ATPB蛋白質(zhì)，由激光共聚焦顯微鏡與二次離子質(zhì)譜成像共同驗(yàn)證蛋白質(zhì)的表達(dá)及在細(xì)胞中的分布情況。通過(guò)生物正交技術(shù)將氘代多肽鏈接到銅伴侶蛋白Atox1中，并將其負(fù)載鉑類(lèi)藥物，向細(xì)胞遞送。對(duì)氟、氘兩種元素標(biāo)簽進(jìn)行ToF-SIMS成像，即可間接實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)的單細(xì)胞成像。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合ToF-SIMS對(duì)抗腫瘤藥物順鉑的成像，在單細(xì)胞水平原位研究順鉑通過(guò)ATP7B和Atox1介導(dǎo)的藥物傳輸過(guò)程，闡明細(xì)胞對(duì)順鉑耐藥性產(chǎn)生的分子機(jī)制。本課題預(yù)期研究成果也將為單細(xì)胞原位研究藥物分子與蛋白質(zhì)靶標(biāo)的相互作用提供新的解決方案。

關(guān)鍵詞

單細(xì)胞;可視化;二次離子質(zhì)譜;抗癌藥物;靶蛋白

線上墻報(bào)僅限年會(huì)已繳費(fèi)參會(huì)代表觀看。

您還沒(méi)有登錄，請(qǐng)您先 點(diǎn)擊這里登錄