分會(huì)

第二十七分會(huì)：色譜分離分析

摘要

新生蛋白質(zhì)組，又稱(chēng)正在翻譯中的蛋白質(zhì)組，可以在翻譯水平上直接揭示基因表達(dá)過(guò)程是如何被調(diào)控的。對(duì)于新生蛋白質(zhì)的鑒定，利用嘌呤霉素進(jìn)行的新生蛋白捕獲反應(yīng)是一種常用的新生蛋白質(zhì)提取與分析的方法。針對(duì)這一反應(yīng)，我們課題組首次提出了一種嘌呤霉素修飾的二氧化硅微球（PMS）的合成，作為分散固相微萃?。―SPME）的吸附劑，并將其應(yīng)用于新生蛋白質(zhì)組的快速深度鑒定，建立了PMSNP分析方法。通過(guò)點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)，嘌呤霉素基團(tuán)在二氧化硅微球上的修飾效率達(dá)到91.8％。在對(duì)PMSNP方法進(jìn)行條件優(yōu)化處理后，分別在13.5小時(shí)內(nèi)在HeLa細(xì)胞和小鼠大腦中鑒定到3500和3900多個(gè)新生蛋白質(zhì)。最終PMSNP方法被成功應(yīng)用于探索生物應(yīng)激模型中翻譯過(guò)程的變化，即脂多糖（LPS）刺激下誘導(dǎo)的HeLa細(xì)胞的抗菌與炎癥反應(yīng)。生物學(xué)功能分析揭示了新生蛋白質(zhì)組的獨(dú)特特征，并顯示了PMSNP方法在鑒定低豐度和分泌新生蛋白質(zhì)方面的優(yōu)越性，從而證明了PMSNP方法對(duì)于新生蛋白質(zhì)組的高效與高靈敏鑒定。

關(guān)鍵詞

嘌呤霉素;新生蛋白質(zhì)組;分散固相微萃取;質(zhì)譜;翻譯

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張容容 復(fù)旦大學(xué)化學(xué)系 共1人點(diǎn)贊了這篇線上墻報(bào)。