分會
第四十一分會:納米生物效應與納米藥物化學
摘要
細胞外囊泡是指從細胞膜上脫落或由細胞分泌的雙層膜結(jié)構的囊泡狀小體,廣泛存在于各種體液中。分析體液中腫瘤細胞外囊泡所攜帶的特異性生物標志物,有望成為一種無創(chuàng)的腫瘤診斷與監(jiān)測方法。由于腫瘤細胞外囊泡在體液中相對數(shù)量太少,難以同時兼顧提取效率和純度,因此對發(fā)展能用于臨床樣品(血漿等)的無分離均相表征方法提出了挑戰(zhàn)。 利用核酸適體分子量小、親和力高并且可以用熒光染料進行標記的優(yōu)點(適體平均10kDa,抗體一般要超過150kDa),我們開發(fā)了一種基于核酸適體的熒光偏振測定技術(AFPExo)用于細胞外囊泡定量檢測,該方法可以在的血漿樣本中進行細胞外囊泡的表征分析。這是一種無需分離、無需擴增且高靈敏度的方法,可以直接表征少于1μL人血漿中的細胞外囊泡。該測定方法利用了細胞外囊泡的雙重性質(zhì),即用于熒光偏振放大的大質(zhì)量或體積以及可被特定低分子量適體識別的表面抗原。因此,染料標記的適體與細胞外囊泡的結(jié)合將顯著改變適體的分子量,導致熒光偏振信號變化。利用該方法,我們可以在每微升體液中對細胞外囊泡進行表征。由于熒光偏振受環(huán)境干擾的影響較小,人體血漿中的細胞外囊泡檢測時不需要任何繁瑣的樣品預處理。我們從肺癌患者和健康供體的臨床樣本中的細胞外囊泡進行了表征驗證。該工作建立了一種無分離均相體系中細胞外囊泡的表征平臺,可直接表征生物體液中的細胞外囊泡,促進了無分離體系下的腫瘤診斷和治療監(jiān)測。
關鍵詞
細胞外囊泡;熒光偏振;核酸適體;無分離
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