分會

第三分會：生物分析化學

摘要

循環(huán)腫瘤細胞（CTC）的分離和檢測可以對原發(fā)腫瘤進行預測性診斷，對臨床診斷和治療產生重大影響1。但活CTC的響應性釋放和下游分析將提供有關分子標記和功能特性等更多有價值的信息。DNA水凝膠為細胞培養(yǎng)創(chuàng)造了彈性,半濕潤的3D良好微環(huán)境，并具有將細胞活力和分子完整性損失最小化的潛力2。更重要的是，可以將響應性DNA水凝膠合理設計為智能傳感器和設備，以響應外部刺激而改變形態(tài)，顏色和大小。在這里，報道了一種DNA水凝膠的細胞捕撈策略，可實現(xiàn)對CTC的有效捕獲，3D包封和CRISPR靶向觸發(fā)釋放，以進行下游活細胞分析。物理交聯(lián)的DNA水凝膠對細胞具有很好的生物相容性。利用CRISPR/Cas12a的可編程性來激活包含細胞的DNA水凝膠，在通過指定的crRNA輸入激活后，Cas12a裂解凝膠中的DNA，水凝膠會發(fā)生分子到宏觀的變化3。實現(xiàn)了從DNA水凝膠網絡到片段的解構，并實現(xiàn)了靶向的細胞釋放。釋放后，細胞的活性得到很好的維持并可以進行下游細胞分析。該策略利用CRISPR/Cas12a的酶學特性，設計了一種改善水凝膠可編程性和多功能性的平臺，為從成千上萬的非靶細胞中捕獲并釋放循環(huán)腫瘤細胞提供了一種強大而有效的方法。

關鍵詞

CRISPR/Cas12a;細胞捕獲;循環(huán)腫瘤細胞;DNA水凝膠

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