分會(huì)

第三分會(huì)：生物分析化學(xué)

摘要

循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）的分離和檢測(cè)可以對(duì)原發(fā)腫瘤進(jìn)行預(yù)測(cè)性診斷，對(duì)臨床診斷和治療產(chǎn)生重大影響1。但活CTC的響應(yīng)性釋放和下游分析將提供有關(guān)分子標(biāo)記和功能特性等更多有價(jià)值的信息。DNA水凝膠為細(xì)胞培養(yǎng)創(chuàng)造了彈性,半濕潤(rùn)的3D良好微環(huán)境，并具有將細(xì)胞活力和分子完整性損失最小化的潛力2。更重要的是，可以將響應(yīng)性DNA水凝膠合理設(shè)計(jì)為智能傳感器和設(shè)備，以響應(yīng)外部刺激而改變形態(tài)，顏色和大小。在這里，報(bào)道了一種DNA水凝膠的細(xì)胞捕撈策略，可實(shí)現(xiàn)對(duì)CTC的有效捕獲，3D包封和CRISPR靶向觸發(fā)釋放，以進(jìn)行下游活細(xì)胞分析。物理交聯(lián)的DNA水凝膠對(duì)細(xì)胞具有很好的生物相容性。利用CRISPR/Cas12a的可編程性來(lái)激活包含細(xì)胞的DNA水凝膠，在通過(guò)指定的crRNA輸入激活后，Cas12a裂解凝膠中的DNA，水凝膠會(huì)發(fā)生分子到宏觀的變化3。實(shí)現(xiàn)了從DNA水凝膠網(wǎng)絡(luò)到片段的解構(gòu)，并實(shí)現(xiàn)了靶向的細(xì)胞釋放。釋放后，細(xì)胞的活性得到很好的維持并可以進(jìn)行下游細(xì)胞分析。該策略利用CRISPR/Cas12a的酶學(xué)特性，設(shè)計(jì)了一種改善水凝膠可編程性和多功能性的平臺(tái)，為從成千上萬(wàn)的非靶細(xì)胞中捕獲并釋放循環(huán)腫瘤細(xì)胞提供了一種強(qiáng)大而有效的方法。

關(guān)鍵詞

CRISPR/Cas12a;細(xì)胞捕獲;循環(huán)腫瘤細(xì)胞;DNA水凝膠

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