分會(huì)
第二十七分會(huì):色譜分離分析
摘要
為了將某些特定蛋白質(zhì)從復(fù)雜生物樣品中有效分離富集,開(kāi)發(fā)具有高選擇性,高吸附率的固相萃?。⊿PE)材料已成為研究的熱點(diǎn)。作為第三代超分子的典型代表,杯芳烴及其衍生物由于獨(dú)特的主-客體識(shí)別特性,廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)的識(shí)別,例如水溶性的對(duì)磺酸化杯[4]芳烴可以與富含賴氨酸或精氨酸的細(xì)胞色素c以及溶菌酶結(jié)合。然而,已有的關(guān)于杯芳烴-蛋白質(zhì)相互作用的報(bào)道主要發(fā)生在溶液中,而杯[4]芳烴修飾的固相材料用于分離富集蛋白質(zhì)的報(bào)道很少。因此,將杯芳烴固定在固體載體上是將其應(yīng)用于蛋白質(zhì)SPE分離純化的重要過(guò)程,而二氧化硅是使用最廣泛的載體材料之一。 本工作以高濃度的聚合物微球?yàn)槟0澹晒Φ睾铣闪舜笮】煽?,結(jié)構(gòu)均一的大介孔二氧化硅微球,并用獨(dú)特的水溶性空腔磺酸化杯[4]芳烴對(duì)其進(jìn)行改性。用多種表征手段對(duì)磺酸化杯[4]芳烴修飾的大介孔二氧化硅微球(SCLX4@LPMS)進(jìn)行研究,并探索了材料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附性能。獲得的SCLX4@LPMS在寬pH范圍內(nèi)(3.0-10.0)對(duì)細(xì)胞色素c和溶菌酶的吸附效率都大于90%,并對(duì)這兩種蛋白具有很高的吸附容量(細(xì)胞色素c:363.64 mg·g-1,溶菌酶:223.71 mg·g-1)。吸附于材料上的細(xì)胞色素c和溶菌酶均可通過(guò)使用含有NaCl的磷酸鹽緩沖溶液作為洗脫液被洗脫。SCLX4@LPMS微球還可用于實(shí)際樣品中蛋白質(zhì)的選擇性吸附分離,如從豬心中分離細(xì)胞色素c,從雞蛋清中分離溶菌酶,在蛋白質(zhì)吸附,藥物遞送,生物傳感器和其他生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域都具有潛在應(yīng)用前景。
關(guān)鍵詞
杯芳烴;介孔硅球;蛋白吸附;溶菌酶;細(xì)胞色素c
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