分會(huì)
第三十五分會(huì):膠體與界面化學(xué)
摘要
肽的含量與疾病和食品安全息息相關(guān),基質(zhì)輔助激光解吸/電離質(zhì)譜(MALDI-MS)是一種重要的分析多肽的方法,但由于其檢測(cè)重現(xiàn)性差、靈敏度低,難以實(shí)現(xiàn)快速、寬范圍的定量分析。在本工作中,我們通過自組裝法在硅片上制備了超疏水聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微球結(jié)構(gòu),并將其作為定量分析肽的MALDI-MS芯片。PMMA的長支鏈具有捕獲肽分子的作用,這種作用可以平衡樣品干燥過程中向外的毛細(xì)力,消除樣品的“咖啡環(huán)”效應(yīng),使肽均勻分布在基底上,并為基質(zhì)/肽的共結(jié)晶提供均勻的成核位點(diǎn),從而提高檢測(cè)的重復(fù)性。同時(shí),PMMA微結(jié)構(gòu)和疏水基團(tuán)降低了結(jié)構(gòu)的表面能,使該基底具有超疏水富集作用,提高了檢測(cè)靈敏度。如將此基底用于檢測(cè)緩激肽1-7,其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD=7.9%,隨機(jī)選取20個(gè)點(diǎn))遠(yuǎn)小于鋼靶的RSD (41.7%),其檢測(cè)限比鋼靶低1000倍,這使得該芯片能夠在寬范圍內(nèi)對(duì)肽進(jìn)行無內(nèi)標(biāo)定量分析,仍以緩激肽1-7為例,可在10-5—10-12 M的范圍內(nèi)實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)(R2 = 0.9905)。該基底可用于實(shí)際樣品分析,如對(duì)牛奶提取物中桿菌肽A 和血清中緩激肽1-7 的定量分析均得到理想的線性關(guān)系。結(jié)果表明,該芯片在多肽定量分析方面具有具有很大的潛力。
關(guān)鍵詞
自組裝;微結(jié)構(gòu);超疏水;肽類分子;無內(nèi)標(biāo)定量
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